РАЗРАБОТКА И ПРИМЕНЕНИЕ МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИХ МЕТОДОВ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГЕРПЕСВИРУСОВ

Филатова О.Н., Аляпкина Ю.С., Щербо Д.С., Колобова О.С., Евсегнеева Ж.В.,

Кузнецова Е.Е., Щербо С.Н., Дегтярев Д.Н.

ГОУ ВПО «Российский государственный медицинский университет», ООО «ЭЛТИ», НПФ «Гентех», Москва

Проявления герпетической инфекции человека разнообразны: герпетические нейроинфекции, офтальмогерпес, генитальный герпес. Известно неблагоприятное влияние герпесвирусов на течение беременности и родов, возникновение патологии новорожденных. Диагностика скрытых, стертых или смешанных форм инфицирования по клиническим признакам может быть затруднена, и в связи с этим молекулярно-генетические методы, обладающие высокой чувствительностью и специфичностью, а также возможностью оценки вирусной нагрузки у новорожденных детей могут помочь в установке правильного диагноза.

Получены первые экспериментальные данные с использованием разработанных нами наборов реагентов для качественного и количественного обнаружения ДНК вируса простого герпеса и цитомегаловируса методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени. В качестве исследуемого материала выбраны 33 образца (кровь, слюна или моча) 13 новорожденных детей с подозрением на наличие герпетической инфекции. Показано, в частности, что содержание ЦМВ в моче одного и того же ребенка может быть на два порядка выше, чем в сыворотке крови: 4х106 и 5х104 геномэкв/мл соответственно. В другом случае при отрицательном результате в крови, в слюне вирусная нагрузка составила 1,3х104 геномэкв/мл. Более высокое содержание вируса в слюне обнаружили у двух пар близнецов и для ВПГ: 2,3х104 и 1,4х104 геномэквив/мл у одной пары и 2,2х103 и 1,3 х 104 геномэквив/мл у другой пары при отрицательном результате в моче (кроме одного из близнецов, где обнаружили 1.4 х 104 геномэквив/мл ДНК ВПГ). Анализ количественного содержания ЦМВ в крови и моче ребенка дал возможность провести правильный подбор препаратов и адекватную терапию. Содержание ЦМВ в околоплодных водах у матери 3,3х104 геномэквив/мл оказалось значительно ниже, чем в крови 5,28х105 и моче 1,75х106 геномэквив/мл, соответственно.