Вход в систему

Особенности цитокинового профиля у больных различными клиническими формами эритем и динамика в ходе иммунотерапии

Сорокина Е.В., Ахматова Н.К., Ахматов Э.А., Масюкова С.А., Чалая Е.Л.
Научно-исследовательский Институт Вакцин и Сывороток им. И.И.Мечникова РАМН, Москва
Кафедра кожных и венерических болезней с курсом косметологии МИУВ ФГБОУ ВПО МГУПП, Москва

<div>Цель исследования: поиск и изучение триггерных факторов в развитии кольцевидной эритемы Дарье, многоформной экссудативной и фиксированной эритемы , особенностей цитокинового профиля и динамики этих показателей в процессе иммунотерапии.&nbsp;</div> <div>Материалы и методы: Определение уровня цитокинов в сыворотках/плазме крови больных проводили методом твердофазного ИФА с использованием тест-систем фирмы &laquo;Biosource&raquo; (Австрия). Определение уровня внутриклеточных цитокинов: спонтанную и индуцированную продукцию цитокинов в супернатантах МЛ определяли при помощи тест-системы FlowCytomixHumanThl/Th2 11 plex с использованием моноклональных антител к цитокинам (GM-CSF, IFN-&gamma;, IL-1&beta;, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-17, TNF-a), производства BenderMedSystems (Австрия). Уровень цитокинов определяли с использованием проточного цитометра FC-500 (Beckman Culter, США).</div> <div>Результаты: Под наблюдением находились 106 пациентов с эритемами (51 больной многоформной экссудативной эритемой (МЭЭ), 41 - фиксированной эритемой (ФЭ) и 14 пациентов с кольцевидной центробежной эритемой Дарье (ЭКЦ)).</div> <div>Таблица 1. Уровни цитокинов в сыворотке крови больных эритемами до лечения</div> <table cellspacing="0" cellpadding="0" border="1"> <tbody> <tr> <td width="109"> <div>&nbsp;</div> <div>Цитокины</div> <div>&nbsp;</div> </td> <td width="111"> <div>Уровень цитокинов в группе здоровых лиц (пкг/мл)</div> </td> <td width="130"> <div>Уровень цитокинов при эритеме кольцевидной центробежной Дарье (пкг/мл)</div> </td> <td width="134" valign="top"> <div>Уровень цитокинов при многоформной экссудативной эритеме (пкг/мл)</div> </td> <td width="139" valign="top"> <div>Уровень цитокинов при фиксированной эритеме (пкг/мл)</div> </td> </tr> <tr> <td width="109"> <div>IL-1b</div> </td> <td width="111"> <div>12&plusmn;3,1</div> </td> <td width="130"> <div>14&plusmn;2*</div> </td> <td width="134"> <div>21&plusmn;8,1*</div> </td> <td width="139" valign="top"> <div>11,2&plusmn;1</div> </td> </tr> <tr> <td width="109"> <div>IL-2</div> </td> <td width="111"> <div>23,5&plusmn;5,2</div> </td> <td width="130"> <div>16&plusmn;3</div> </td> <td width="134"> <div>11,7&plusmn;0,8*</div> </td> <td width="139" valign="top"> <div>11,5&plusmn;1,9</div> </td> </tr> <tr> <td width="109"> <div>IL-4</div> </td> <td width="111"> <div>11&plusmn;4,3</div> </td> <td width="130"> <div>11&plusmn;1</div> </td> <td width="134"> <div>9,7&plusmn;0,9</div> </td> <td width="139" valign="top"> <div>12,9&plusmn;1,7</div> </td> </tr> <tr> <td width="109"> <div>IL-5</div> </td> <td width="111"> <div>14&plusmn;2,3</div> </td> <td width="130"> <div>11,6&plusmn;1,7</div> </td> <td width="134"> <div>15,5&plusmn;0,7</div> </td> <td width="139" valign="top"> <div>16,8&plusmn;0,97</div> </td> </tr> <tr> <td width="109"> <div>IL-6</div> </td> <td width="111"> <div>23&plusmn;5</div> </td> <td width="130"> <div>22&plusmn;4,8</div> </td> <td width="134"> <div>19,1&plusmn;8,7</div> </td> <td width="139" valign="top"> <div>11,7&plusmn;0,9</div> </td> </tr> <tr> <td width="109"> <div>IL-10</div> </td> <td width="111"> <div>18&plusmn;7,2*</div> </td> <td width="130"> <div>16,4&plusmn;2,4</div> </td> <td width="134"> <div>15,9&plusmn;2</div> </td> <td width="139" valign="top"> <div>21,2&plusmn;2,3</div> </td> </tr> <tr> <td width="109"> <div>IL-12</div> </td> <td width="111"> <div>7&plusmn;1,4</div> </td> <td width="130"> <div>16,4&plusmn;7</div> </td> <td width="134"> <div>10,2&plusmn;3,3</div> </td> <td width="139" valign="top"> <div>6,3&plusmn;0,6</div> </td> </tr> <tr> <td width="109"> <div>IL-17</div> </td> <td width="111"> <div>16,3&plusmn;3,5</div> </td> <td width="130"> <div>15&plusmn;1,3</div> </td> <td width="134"> <div>18,5&plusmn;1,4</div> </td> <td width="139" valign="top"> <div>18&plusmn;2</div> </td> </tr> <tr> <td width="109"> <div>IFN-&gamma;</div> </td> <td width="111"> <div>28&plusmn;1,5*</div> </td> <td width="130"> <div>46&plusmn;9*</div> </td> <td width="134"> <div>37,9&plusmn;5,8</div> </td> <td width="139" valign="top"> <div>17&plusmn;1,3</div> </td> </tr> <tr> <td width="109"> <div>TGF-&beta;</div> </td> <td width="111"> <div>43&plusmn;5,4</div> </td> <td width="130"> <div>н.о.</div> </td> <td width="134"> <div>34&plusmn;4,4</div> </td> <td width="139" valign="top"> <div>44&plusmn;3,4</div> </td> </tr> </tbody> </table> <div>&nbsp;</div> <div>Примечание. * р&lt;0,05 &ndash; достоверность различий между показателями у здоровых лиц и пациентов с ЭКЦ.</div> <div>При изучении цитокинового профиля у больных ЭКЦ в сыворотке крови исходно наблюдалось достоверное снижение уровня провоспалительного цитокина IL-2, а также противовоспалительных TGF-&beta; и IL-10 на фоне повышения уровня провоспалительного IL-1&beta; и регуляторных IL-12 и IFN-&gamma; по сравнению с группой здоровых лиц.</div> <div>При исследовании продукции внутриклеточных цитокинов выявлено, что наиболее высокие уровни экспрессии отмечались в отношении IL-2, причем из 100% лимфоцитов синтезировали цитокин 53% лимфоцитов с маркером CD8. При этом в ходе индукции ФГА происходило усиление синтеза IL-2 CD8+ лимфоцитами, в то время как гранулоциты снижали секрецию этого цитокина. Число лимфоцитов, спонтанно синтезирующих IL-8 у больных ЭКЦ составило 19,2%, гранулоцитов - 77,9 %, причем из 100% лимфоцитов этот цитокин синтезировали 37,8 % лимфоцитов с маркером CD16+. При этом индуцированная продукция IL-8 лимфоцитами, в том числе CD16+ снижалась. TNF- &alpha; синтезировали спонтанно 23,5% лимфоцитов, из них 36,7% CD8+, и 7,5% гранулоцитов. Наблюдалось усиление лимфоцитами индуцированной продукции IL-4относительно спонтанной с 5,9% до 18,7%. Индуцированная продукция IFN-&gamma; лимфоцитами превышала спонтанную продукцию в несколько раз у больных ЭКЦ и составила 17,5% относительно 1,1% при спонтанной продукции. Спонтанная продукция IFN-&gamma; наблюдалась у 18% NK-клеток, при этом индуцированная составила 39,4% (Таб.2)</div> <div>Таблица 2. Продукция цитокинов МЛПК у больных эритемой кольцевидной центробежной Дарье до лечения</div> <div> <table width="654" cellspacing="0" cellpadding="0" border="1"> <tbody> <tr> <td width="78" valign="top"> <div>&nbsp;</div> </td> <td width="274" valign="top" colspan="3"> <div>Спонтанная продукция цитокинов внутриклеточно, % экспрессирующих клеток (M&plusmn;m)</div> </td> <td width="302" valign="top" colspan="3"> <div>Индуцированная ФГА продукция цитокинов внутриклеточно, % экспрессирующих клеток (M&plusmn;m)</div> </td> </tr> <tr> <td width="78" valign="top"> <div>&nbsp;</div> </td> <td width="82" valign="top"> <div>&nbsp;</div> </td> <td width="98" valign="top"> <div>Gr</div> </td> <td width="94" valign="top"> <div>L</div> </td> <td width="101" valign="top"> <div>&nbsp;</div> </td> <td width="94" valign="top"> <div>Gr</div> </td> <td width="107" valign="top"> <div>L</div> </td> </tr> <tr> <td width="78" valign="top"> <div>&nbsp;</div> </td> <td width="274" valign="top" colspan="3"> <div>В т.ч. CD8</div> </td> <td width="302" valign="top" colspan="3"> <div>В т.ч. CD8</div> </td> </tr> <tr> <td width="78" valign="top"> <div>IL-2</div> </td> <td width="82" valign="top"> <div>53&plusmn;10,3</div> </td> <td width="98" valign="top"> <div>88,3&plusmn;2,3</div> </td> <td width="94" valign="top"> <div>42&plusmn;9,2</div> </td> <td width="101" valign="top"> <div>68,2&plusmn;5,7</div> </td> <td width="94" valign="top"> <div>70,3&plusmn;11</div> </td> <td width="107" valign="top"> <div>45,1&plusmn;8,1</div> </td> </tr> <tr> <td width="78" valign="top"> <div>IL-4</div> </td> <td width="82" valign="top"> <div>31,5&plusmn;7,6</div> </td> <td width="98" valign="top"> <div>0,3&plusmn;0,2*</div> </td> <td width="94" valign="top"> <div>5,96&plusmn;5,6</div> </td> <td width="101" valign="top"> <div>35,9&plusmn;10,3</div> </td> <td width="94" valign="top"> <div>3,1&plusmn;1,7*</div> </td> <td width="107" valign="top"> <div>18,7&plusmn;6,2</div> </td> </tr> <tr> <td width="78" valign="top"> <div>TNF-&alpha;</div> </td> <td width="82" valign="top"> <div>36,7&plusmn;9,2</div> </td> <td width="98" valign="top"> <div>7,48&plusmn;8,9</div> </td> <td width="94" valign="top"> <div>23,5&plusmn;21,8</div> </td> <td width="101" valign="top"> <div>39,3&plusmn;9,2</div> </td> <td width="94" valign="top"> <div>6,5&plusmn;6,7</div> </td> <td width="107" valign="top"> <div>20,8&plusmn;11,7</div> </td> </tr> <tr> <td width="78" valign="top"> <div>&nbsp;</div> </td> <td width="274" valign="top" colspan="3"> <div>В т.ч. CD16</div> </td> <td width="302" valign="top" colspan="3"> <div>В т.ч. CD16</div> </td> </tr> <tr> <td width="78" valign="top"> <div>IL-8</div> </td> <td width="82" valign="top"> <div>37,8&plusmn;10,7</div> </td> <td width="98" valign="top"> <div>77,9&plusmn;10,7</div> </td> <td width="94" valign="top"> <div>19,2&plusmn;6,6</div> </td> <td width="101" valign="top"> <div>30,1&plusmn;6,8</div> </td> <td width="94" valign="top"> <div>81,2&plusmn;9,2</div> </td> <td width="107" valign="top"> <div>10,7&plusmn;4,8</div> </td> </tr> <tr> <td width="78" valign="top"> <div>&nbsp;</div> </td> <td width="274" valign="top" colspan="3"> <div>В т.ч. NK(CD56+)</div> </td> <td width="302" valign="top" colspan="3"> <div>В т.ч. NK(CD56+)</div> </td> </tr> <tr> <td width="78" valign="top"> <div>IL-6</div> </td> <td width="82" valign="top"> <div>2,1&plusmn;0,1</div> </td> <td width="98" valign="top"> <div>57,7&plusmn;10,1</div> </td> <td width="94" valign="top"> <div>3,12&plusmn;1</div> </td> <td width="101" valign="top"> <div>4,5&plusmn;0,8</div> </td> <td width="94" valign="top"> <div>72,6&plusmn;4,8</div> </td> <td width="107" valign="top"> <div>1,7&plusmn;0,6</div> </td> </tr> <tr> <td width="78" valign="top"> <div>IFN-&gamma;</div> </td> <td width="82" valign="top"> <div>18&plusmn;12*</div> </td> <td width="98" valign="top"> <div>28,1&plusmn;7,5</div> </td> <td width="94" valign="top"> <div>1,1&plusmn;0,3*</div> </td> <td width="101" valign="top"> <div>39,4&plusmn;10,1*</div> </td> <td width="94" valign="top"> <div>32,1&plusmn;12,9</div> </td> <td width="107" valign="top"> <div>17,5&plusmn;10,6*</div> </td> </tr> </tbody> </table> </div> <div><span style="font-size: 10pt;">&nbsp;* p&lt;0,05 &ndash; достоверное различие между спонтанной и индуцированной продукцией цитокинов. Cr &ndash; гранулоциты,&nbsp; L &ndash; лимфоциты.</span></div> <div>У больных ЭКЦ исходно наблюдалась высокая спонтанная продукция IL-2, IL-8, TNF-&alpha; в сочетании с угнетением&nbsp; индуцированной экспрессииIL-8 и TNF-&alpha;. Кроме этого, отмечалось снижение спонтанной и индуцированной продукции IFN-&gamma;. При этом индукция ФГА вызывает у больных усиление продукцииIFN-&gamma; лимфоцитами в 17 раз, в то время как у здоровых лиц индуцированная продукция превышает спонтанную только в 2 раза. У больных МЭЭ в сыворотке наблюдали повышенную продукциюIL-1&beta; до 21&plusmn;8,1 пкг/мл, IFN-&gamma; до 37,9&plusmn;5,8 пкг/мл на фоне снижения продукции IL-2 до 11,7&plusmn;0,8 пкг/мл и супрессорного цитокина TGF-&beta; до 34&plusmn;4,4 пкг/мл. У больных ФЭ исходно выявили низкие уровни цитокинов IL-2(11,5&plusmn;1,9 пкг/мл), IL-6(11,7&plusmn;0,9пкг/мл), IFN&ndash;&gamma;(17&plusmn;1,3 пкг/мл). У всех обследованных больных ЭКЦ, МЭЭ и ФЭ исходно наблюдается снижение продукцииIL-2, что может указывать на нарушение пролиферации Т- и NK-клеток.</div> <div>При изучении влияния иммунотерапии на цитокиновый профиль у больных эритемами выявлено, что в группе больных ЭКЦ применение Иммуновак-ВП-4 способствовало повышению уровня сывороточного IFN-&gamma; до 63,0&plusmn;6,0% иIL-2 до 23,5&plusmn;2,8%, а терапия Кагоцелом приводила к повышению IL-5 до 20,2&plusmn;5,6% (p&gt;0,05). Различия интенсивности влияния терапии на динамику уровней сывороточных цитокинов наиболее выражены в отношении IFN-&gamma;: Иммуновак-ВП-4 обладал наиболее высокой активностью к индукции данного цитокина. У больных МЭЭ Иммуновак-ВП-4 способствовал повышению уровня сывороточного IFN-&gamma; до 62,0&plusmn;11,0%, незначительному повышению IL-1&beta; и снижению IL-17, в то время как Кагоцел приводил к повышению IL-4, IL-2, IFN-&gamma; и снижению TGF-&beta; и IL-12 (p&lt;0,05). У больных ФЭ лечение Иммуновак-ВП-4 способствовало повышению уровня сывороточного IFN-&gamma;, IL-1&beta;, IL-6 до 34&plusmn;2,9%, 21,1&plusmn;3,6% и 21,1&plusmn;0,5% соответственно, Кагоцел повышал IFN-&gamma; (до 25,4&plusmn;3,5%) и снижал TGF-&beta; (до 23,3&plusmn;6%) (p&lt;0,05). Таким образом, включение в комплекс терапевтических мероприятий у больных эритемами иммуномодуляторов Иммуновак-ВП-4 и Кагоцел способствовало активации звеньев врожденного иммунитета. В дальнейшем исследования будут направлены на изучение особенностей врожденного иммунитета при хронических дерматозах, в частности микробной экземе.</div>
Выходные данные: Сорокина Е.В., Ахматова Н.К., Ахматов Э.А., Масюкова С.А., Чалая Е.Л. Особенности цитокинового профиля у больных различными клиническими формами эритем и динамика в ходе иммунотерапии.
Тезисы XXXI научно-практической конференции Рахмановские чтения.
  • Дерматология в России. 2014; 3 (S1)
Стр. 74
Ваша оценка: Нет Средний рейтинг: 5 (4 votes)